Презентация, доклад на тему Влияние фемтосекундного лазерного излучения на нейтрофилы человека in vitro

Университет
Им. И.Н. Ульянова

Барышева Татьяна Сергеевна

Руководитель: к.б.н., доцент Валкина О.Н

Ульяновск 2011

средств и способов воздействия на фагоцитирующие клетки. Перспективным подходом к решению данной проблемы может являться применение физических воздействий, таких как лазерное излучение, в качестве немедикаментозных стимуляторов клеточного и гуморального звеньев иммунитета.
В нашем случае облучение нейтрофилов осуществлялось с помощью фемтосекундного лазера. Фемтосекундные лазеры — сверхкороткие, сверхинтенсивные импульсы. Уникальная особенность такого лазера — способность благодаря высокой мощности выполнить задачу взаимодействия с целью, сделав это без передачи тепла на окружающую область, что обеспечивается краткостью импульса. Для измерения столь малых промежутков времени используют специальную единицу - фемтосекунду (фс): 1 фс = 10–15 с.
Объектом исследования были нейтрофилы. Их легко узнать под микроскопом по ядру, обычно разделенному на три или более части, в зависимости от степени зрелости. В основе неспецифической клеточной защиты лежит способность нейтрофилов к фагоцитозу.
Облучение нейтрофилов фемтосекундным лазером осуществлялось in vitro— это технология выполнения экспериментов, когда опыты проводятся в пробирке, либо, в более общем смысле, вне живого организма.

Актуальность работы.

исследования 1. Изучить динамику показателей кислородозависимого метаболизма нейтрофилов при действии фс лазера 2. Изучить динамику показателей кислороднезависимого (анаэробного) метаболизма нейтрофилов при действии фс лазера 3. Оценить фагоцитарную активность нейтрофилов при действии фс лазера.

здоровых женщин-доноров. Отмытые нейтрофилы облучали в пластиковых кюветах глубиной 1 см. В качестве источника фемтосекундного лазерного излучения использовали волоконный эрбиевый лазер (уникальное изобретение НЦВО РАН при содействии Москвы и УлГУ.) с характеристиками: 1. длительность импульса 2х10-13, 2. средняя мощность 1,25х10-3 Вт, 3. пиковая мощность 6х103 Вт. 4.перестройка по длине волны 1420 - 1750 Были использованы дозы облучения от 8,5 мДж/см2 до 237 мДж/см2 из расчета средней мощности импульса. Дозу облучения высчитывали исходя из средней мощности, времени воздействия, площади поверхности и высоты световода.

Методики: 1. Цитохимическое определение активности МПО нейтрофилов проводили по методу Грэкхема-Кноля (1966) 2. Цитохимические определение уровня активности КБ Нф проводили по методу М.Г.Шубича (1974) с бромфеноловым синим 3. Для цитохимического выявления КФ использовали метод азосочетания по методу Burstone и Li с соавторами (1970) 4. Для цитохимическог определения активности ЩФ использовали азосочетания по Rutenburg с соавторами (1965) 5. Для определения фагоцитарной активности применяли стандартную методику с использованием дрожжей

лазером.

лазером.

облучения фемтосекундным лазером.

метаболизма нейтрофилов. 2.Уровень КБ снижается при облучении дозой 8,5 мДж/см2 а Кф при этой же дозе возрастает. Активность КБ возрастает при воздействии дозой 237 мДж/см2 , в то время как уровень ЩФ при этой дозе уменьшается При облучении Нф дозой в 42,3 мДж/см2 показатели ЩФ возрастают, а КФ понижается. 3. количество Нф возрастает при дозе облучения в 23,7 мДж/см2 , в сравнении с контролем (41,2 %), а ФЧ, относительно контроля, значительно уменьшается.