Слайд 1ГБУ ПОО
«Астраханский Базовый Медицинский Колледж»
«Микроскопическое исследование мокроты»
Слайд 2Микроскопическое исследование Мокроты
Приготовление и изучение нативных препаратов
Микроскопическое исследование состоит из изучения
нативных и окрашенных препаратов. Полноценность исследования мокроты целиком зависит от правильного приготовления и количества просмотренных препаратов.
Слайд 3Мокроту, помещенную в чашки Петри, рассматривают на белом и черном фоне.
Узким шпателем и иглой (можно пользоваться деревянными лучинами) выбирают различные составные части мокроты (комочки гноя, слизи, крови, тканевые клочки).
Слайд 4Необходимо также брать для исследования все частицы, отличающиеся формой, окраской, плотностью
от фона мокроты. Отобранный материал помещают на предметное стекло и накрывают покровным.
Слайд 5Количество материала, взятого для одного препарата, должно быть таково, чтобы мокрота
не выходила за пределы покровного стекла. Если мокрота имеет вязкую или тягучую консистенцию, то на покровное стекло слегка надавливают, чтобы материал распределился равномерно тонким слоем.
Слайд 6Препараты сначала рассматривают под малым увеличением (объектив 8, окуляр 7), затем
под большим (объектив 40, окуляр 7) увеличением микроскопа.
Слайд 7Просмотр под малым увеличением дает ориентировочное представление о качестве выбранного материала,
о количестве тех или иных клеток и других образований, позволяет быстрее обнаружить элементы, встречающиеся в мокроте в небольшом количестве (эластические волокна, спирали Куршмана, комплексы опухолевых клеток и др.)
Слайд 8Просмотр с большим увеличением необходим для детального исследования материала. Следует учитывать,
что элементы в мокроте распределяются всегда неравномерно, поэтому необходимо тщательное исследование серии препаратов.
Слайд 9Если при исследовании нативного препарата возникает необходимость в его окраске, то
под контролем микроскопа покровное стекло снимают, перемещая в одну сторону, а предметное стекло – в другую, и отмечают стеклографом на обратной стороне препарата интересующий участок. Затем препарат высушивают и окрашивают.
Слайд 10Элементы мокроты, которые обнаруживаются в нативном препарате, можно разделить на три
основные группы:
клеточные,
2) волокнистые,
3) кристаллические.
Слайд 11КЛЕТОЧНЫЕ ЭЛЕМЕНТЫ
Лейкоциты всегда содержатся в мокроте в большем или меньшем количестве
в зависимости от характера мокроты. Чем больше гноя в мокроте, тем больше лейкоцитов. Лейкоциты – круглые клетки диаметров от 10-12 до 15 мкм с плохо различимым ядром и однородной обильной зернистостью.
Слайд 12Они могут быть хорошо сохранившимся или в различных стадиях дегенерации. Определение
видов лейкоцитов производят в окрашенном препарате
Слайд 13Эозинофилы распознаются в нативном препарате по более темной окраске и наличию
в цитоплазме четкой, крупной, одинаковой, обильной, темной, преломляющей свет зернистости. Распределяются они в препаратах неравномерно, часто в виде больших скоплений в отдельных участках.
Слайд 14Эозинофилы встречаются при бронхиальной астме и других аллергических состояниях, при наличии
гельминтов, эхинококке легкого, эозинофильных инфильтратах, злокачественных новообразованиях
Слайд 15Эозинофилы встречаются при бронхиальной астме и других аллергических состояниях, при наличии
гельминтов, эхинококке легкого, эозинофильных инфильтратов, злокачественных новообразованиях
Слайд 16Эритроциты имеют вид дисков желтоватого цвета. Единичные эритроциты могут встречаться в
любой мокроте. В большом количестве обнаруживаются в кровянистой мокроте при легочном кровотечении, инфаркте легкого, туберкулезе, застое в малом круге кровообращения, новообразованиях легкого и др.
Слайд 17Клетки плоского эпителия попадают в мокроту со слизистой полости рта. Единичные
клетки плоского эпителия встречаются всегда.
Слайд 18Большое число клеток говорит о примеси слюны или о недостаточном туалете
полости рта перед сбором мокроты для исследования, особенно при наличии зубных протезов или воспалительных явлениях в ротовой полости.
Слайд 19Цилиндрический мерцательный эпителий выстилает слизистую оболочку трахеи и бронхов. Клетки имеют
удлиненную, клиновидную, цилиндрическую, реже овальную форму, расширенную у апикального конца, обращенного в просвет бронха, суженную у основания.
Слайд 20В клетках может определяться овальное ядро, расположенное эксцентрично, ближе к базальной
части клетки. На расширенном конце клетки нередко видны реснички, в свежей мокроте они могут двигаться.
Слайд 21Клетки цилиндрического эпителия располагаются одиночно, группами, иногда большими скоплениями. Клетки мерцательного
эпителия в большом количестве обнаруживаются при остром приступе бронхиальной астмы, остром бронхите, острых катаральных поражениях верхних дыхательных путей, новообразованиях легкого.
Слайд 22Альвеолярные макрофаги – клетки гистиоцитарной системы. Они имеют округлую или овальную
форму, размер от 15 до 20-25 мкм, эксцентрично расположенное ядро, вакуолизированную цитоплазму, содержащую различные включения темно-бурого цвета.
Слайд 23В препаратах располагаются в виде скоплений. Встречаются при различных воспалительных процессах
в бронхах и легочной ткани (пневмониях, бронхитах, профессиональных заболеваниях легких). При хронических заболеваниях выявляются жироперерожденные макрофаги (клетки с жировой дистрофией, липофаги). Это клетки округлой формы, цитоплазма которых заполнена каплями жира.
Слайд 24При добавлении к препарату судана ІІІ капли жира окрашиваются в оранжевый
цвет. Скопления таких клеток встречаются при злокачественных новообразованиях, туберкулезе, эхинококке легкого, актиномикозе и др.
Слайд 25Пылевые клетки (кониофаги) с фагоцитированными частицами пыли, угля часто выявляются у
людей с профессиональными заболеваниями легких (у курильщиков, работников табачной, мукомольной промышленности).
Слайд 26Сидерофаги – альвеолярные макрофаги, содержащие гемосидерин и имеющие в цитоплазме золотисто-желтые
включения. С достоверностью их определяют реакцией на берлинскую лазурь. С препарата, в котором были обнаружены альвеолярные макрофаги с желтыми или золотисто-желтыми включениями , снимают покровное стекло и слегка подсушивают на воздухе.
Слайд 27Затем на препарат наливают 1-2 капли 30 г/л раствора хлористоводородной кислоты
(HCl) и 1-2 капли 50 г/л раствора желтой кровяной соли. Можно готовить смесь из равных частей этих реактивов в пробирке.
Слайд 28Препарат покрывают покровным стеклом и через 8-10 мин микроскопируют под большим
увеличением. При наличии гемосидерина альвеолярные макрофаги окрашиваются в сине-зеленый (голубой) цвет.
Слайд 29Сидерофаги обнаруживают в мокроте при застойных явлениях в легком, инфарктах легкого,
кровоизлияниях.
Слайд 30Волокнистые образования
Эластические волокна являются элементами соединительной ткани и встречаются в мокроте
при деструктивных процессах в легких. В нативном препарате эластические волокна имеют вид извитых, блестящих, тонких, нежных волокон равномерной толщины на всем протяжении, складывающихся пучками.
Слайд 31Иногда рисунок их повторяет строение альвеолярной ткани. Как правило, располагаются на
фоне лейкоцитов и детрита. Обнаруживаются при туберкулезе, абсцессе, новообразованиях легких, гангрене легкого.
Слайд 32При кавернозном туберкулезе в результате отложения на волокна жировых кислот и
мыл они становятся грубыми, толстыми, имеют названия коралловидных. Обнаруживаются редко. При обработке из 100 г/л раствором едкой щелочи мыла растворяются и выявляются обычного вида эластичные волокна.
Слайд 33Обызвествленные эластические волокна – грубые, толстые, пропитанные солями извести палочковидные образования.
Обломки их имеют вид пунктирной линии, состоящей из сероватых, преломляющих свет палочек.
Слайд 34Обнаруживают в мокроте при распаде туберкулёзного очага и носят названия тетрады
Эрлиха и включают:
обызвествленные эластические волокна;
2) аморфные соли извести;
3) кристаллы холестерина;
4)микобактерии туберкулеза (КУБ)
Слайд 35Спирали Куршмана – уплотненные, закрученные в спираль образования из слизи. Центральная
осевая нить резко преломляют свет, выглядит блестящей спиралью. По периферии слизь лежит более свободно и образует так называемую мантию.
Слайд 36Величина их может быть различной. Иногда они видны микроскопически. Спирали образуются
при наличии спазма или сдавления бронхов, содержащих вязкий слизистый секрет, откашливаемый с трудом. Часто они обнаруживаются в мокроте больных бронхиальной астмой или опухоли легкого.
Слайд 37Кристаллические образования
Кристаллы Шарко-Лейдена имеют вид вытянутых, блестящих бесцветных ромбов с заостренными
концами различной величины, напоминающих стрелку магнитного компаса. Образуются из распадающихся эозинофилов.
Слайд 38Свежевыделенная мокрота часто не содержит кристаллов Шарко-Лейдена, они появляются в ней
через 24 ч. Характерно присутствие этих кристаллов при бронхиальной астме не только на высоте приступа, но и в межприступном периоде. Они встречаются также при глистных поражениях легких.
Слайд 39Кристаллы гематоидина имеют форму ромбов, иногда иголок золотисто-желтого цвета. Являются продуктом
распада гемоглобина, образуются в глубине гематом и обширных кровоизлияний, в некротизированной ткани.
Слайд 40В препаратах мокроты располагаются на фоне детрита, эластических волокон, в некротизированных
тканевых клочках.
Слайд 41Кристаллы холестерина имеют вид бесцветных табличек четырехугольной формы с обломанным углом
в виде ступенек, образуются при распаде жироперерожденных клеток, при задержке мокроты в полостях, располагаются на фоне детрита, нередко в сочетании с эластическими волокнами.
Слайд 42Встречаются при туберкулезе, новообразованиях, абсцессе легкого, гангрене легкого, эхинококкозе
Слайд 43Исследование окрашенных препаратов
Для исследования морфологии клеточных элементов мокроты используют окраску по
Романовскому и Папенгейму. При окраске мокроты этим методом необходимо учитывать ее характер (если много слизи, толстый препарат – окраска более продолжительная).
Слайд 44При подозрении на наличие злокачественного новообразования экспозиция окраски сокращается. В окрашенных
препаратах дифференцируются следующие клеточные элементы.
Слайд 45Нейтрофилы составляют основную массу лейкоцитов. Представляют собой округлые, иногда неправильной формы
клетки 8 – 13 мкм с сегментированным ядром и зернистой цитоплазмой. От нейтрофилов крови они отличаются менее правильной формой, нечеткими очертаниями, часто имеют распавшееся на отдельные фрагменты ядро.
Слайд 46Дегенеративно измененные нейтрофилы чаще встречаются в гнойной мокроте при абсцессе, туберкулезе
легкого, бронхоэктазах. Уменьшение их обычно связанно с клиническим улучшением.
Слайд 47Эозинофилы в мокроте встречаются в виде отдельных клеток, иногда скоплениями. Они
имеют округлую форму (10-14 мкм). Ядро двухсегментное, иногда круглое. Цитоплазма заполнена крупной, одинакового размера ярко-розовой зернистостью.
Слайд 48Иногда при бронхиальной астме эозинофилы в скоплениях разрушаются и видны в
виде массы эозинофильных зерен, среди которых можно обнаружить отдельные сохранившиеся клетки.
Слайд 49Лимфоциты – клетки круглой формы (7-14 мкм), ядро заполняет большую часть
клетки, цитоплазма узким ободком окружает ядро, иногда в виде полумесяца.
Слайд 50Базофилы (тучные клетки) имеют круглую форму, размеры 8-10мкм, с ядром чаще
неопределенной лапчатой формы, заполненные крупной темно – фиолетовой (базофильной) зернистостью, густо покрывающей ядро.
Слайд 51Гистиоциты
Ядро округлое или овальное, располагается чаще эксцентрично, окрашивается неинтенсивно. Отдельные клетки
имеют бобовидные или палочковидные ядра. Цитоплазма слабобазофильная, часто вакуолизированная.
Слайд 52Альвеолярные макрофаги круглой и овальной формы, диаметром 10-30 мкм. Ядро имеет
бобовидную, округлую, иногда палочковидную форму и небольшие размеры относительной широкой цитоплазмы. Хроматин ядра мелкозернистый, однородный.
Слайд 53Гигантские многоядерные клетки хронического воспаления(клетки инородных тел). Ядра округлые, одинаковые по
величине, с нежным сетчатым рисунком хроматина. Ядра распределены в цитоплазме равномерно или собраны в центре клетки. Цитоплазма обильная, базофильная. Границы клеток четкие.
Слайд 54В одной клетке может быть два или более ядер. Цитоплазма пенистая,
бледно-голубого или розового цвета с отчетливыми контурами. Эти клетки при обильных включениях могут окрашиваться в бурый, коричневый или черный цвет.
Слайд 55Эпителиоидные клетки. Форма их овальная, реже округлая. Ядра бобовидные, грушевидные, овальные
или вытянутые, почкообразные, с четкими контурами. Хроматин мелкоточечный, нежный, равномерно распределенный.
Слайд 56Цитоплазма умеренно выраженная, светлая, базофильная, иногда слегка вакуолизированная, часто с неточными
контурами. Являясь элементами туберкулезной гранулемы, эпителиоидные клетки присутствуют в мокроте при туберкулезе, саркоидозе.
Слайд 57Клетки Пирогова-Лангханса.
Гигантские многоядерные клетки, содержат до 20 и более ядер.
Ядра почти не отличаются от ядер эпителиоидных клеток. Имеют вытянутую форму, нежную структуру хроматина, располагаются в виде частокола на периферии клетки, иногда на одном ее половине.
Слайд 58Цитоплазма обширная, бледно-голубая, однородна. Клетки Пирогова-Лангханса входят в состав туберкулезной гранулемы,
но в мокроте встречаются редко. При казеозном распаде они быстро разрушаются.
Слайд 59Плоский эпителий представлен поверхностными и промежуточными клетками. Клетки большие, округлые или
полигональные с небольшим центрально расположенным ядром. Плоский эпителий полости рта покрыт бактериями.
Слайд 60Эпителий бронхов в зависимости от калибра бронха имеет форму от призматической
до кубической. Среди клеток эпителия бронхов встречаются бокаловидные и реснитчатые клетки.
Слайд 61Реснитчатые клетки имеют вытянутую форму с одним широким и вторым конически
суженным концом. На широкой апикальной части клетки находится кутикулярный ободок (утолщенная клеточная мембрана), от которого отходят реснички.
Слайд 62Ядро овальной или округлой формы с нежным мелкозернистым хроматином смещено ближе
к ее суженной базальной части. Цитоплазма гомогенная, слабобазофильная. В зависимости от расположения клетки могут иметь треугольную, округлую и неправильную форму.
Слайд 63Располагаются они разрозненно, группами, иногда пластами. В пластах клетки напоминают пчелиные
соты с круглым ядром, окруженными узким ободком цитоплазмы.
Слайд 64Цитоплазма слабобазофильная, вакуолизированная из-за большого содержания слизи, ядро резко смещено к
узкому дистальному концу клетки.