Презентация, доклад лабораторная работа Осаждение белков нагреванием, кислотами, органическими растворителями

неорганическими кислотами, органическими
растворителями.


Цель: изучить р-ции на белки, основанные на осаждении
специальными реактивами, изучить процесс
денатурации белка, его причины.

денатурации заключается в разрушении гидратной оболочки, разрыве стабилизирующих белковую глобулу связей и развертывании белковой молекулы.
-Наиболее полное и быстрое осаждение происходит в изоэлектрической точке (когда заряд молекулы равен нулю), т.к. частицы белка при этом наименее устойчивы.
-Белки, обладающие кислыми свойствами, осаждаются в слабокислой среде, а белки с основными свойствами – в слабо-щелочной.
-В сильнокислых или сильнощелочных р-рах денатурированный при нагревании белок в осадок не выпадает, т.к. его частицы перезаряжаются и несут в первом случае положительный, а во втором – отрицательный заряд, что повышает их устойчивость в растворе.

Ход работы:

I. Осаждение белков при кипячении

р-ра)

Но т.к. частицы денатурированного белка несут заряд, они в осадок не выпадают. Это связано с тем, что яичный белок имеет кислые св-ва (его изоэлектрическая точка 4,8) и в нейтральной среде заряжен отрицательно

? 1% р-р
уксусной к-ты

Белок выпадает в осадок

Т.к. его р-р приближается к изоэлектрической точке и белок теряет заряд (один из факторов устойчивости белка в р-ре)

? 10% р-р
уксусной к-ты

Осадок не образуется

Т.к. в сильнокислой среде частицы белка приобретают положительный заряд (сохраняется один из факторов устойчивости белка в р-ре)

? 10% р-р
NaOH

Осадок не образуется

Т.к. в щелочной среде отрицательный заряд белка увеличивается

?? 10% р-р
уксусной
к-ты

?насыщенный
р-р NaCl

Белок выпадает в осадок

белка

Осадки, вызванные действием минеральных к-т (азотной, серной, соляной) растворяются в избытке соляной и серной, но не растворяются в избытке азотной (нитратной) кислотах

На границе белка и
к-ты появляется белое кольцо

+ избыток нитратной к-ты

Вот почему для определения малых количеств белка в моче в клинических лабораториях пользуются азотной кислотой

II. Осаждение белков конц. нитратной кислотой

ацетон) вызывают дегидратацию белковых молекул, разрушают их водные оболочки, что понижает устойчивость белков в р-ре и ведёт к выпадению в осадок. Способствует осаждению присутствие электролитов (например, NaCl).
-Осаждение белков спиртом обратимо при условии, если процесс проводили без нагревания и воздействие реагента было кратковременным. Продолжительный контакт белка со спиртом ведёт к необратимому осаждению, денатурации.

4 мл спирта

Белок выпадает в осадок

концентрация спирта падает и белок снова переходит в р-р

?

дистил. вода